为水情狂的回答：
基因表达载体的构建 是将目的基因与运载体结合的过程
基因表达载体的构建方法有几种
热心网友的回答：
你好，具体的看看这个吧
希望有所帮助
热心网友的回答：
现在很多生物公司可以提供载体构建服务的，例如中美泰和生物技术公司
如何构建一个基因的过表达载体
风翼残念的回答：
当拿到一个基因的dn**段后，就需要把它汇入一个载体，一方面长期储存。另一方面也需要以载体为媒介将基因汇入受体细胞中。基因表达载体的构建是基因工程的核心。
常用的载体有细菌质粒，噬菌体和动植物病毒。其中质粒载体最常用。所谓载就是一个很长的环状dna，携带一些基因，可以汇入细菌中自我複製，也可以从细菌中提取出来改造。
现在我们就需要把sun片段连到一个载体，用vectornti开启，研究一下用哪个酶处理，这个载体需要用**a1这个酶切开，然后用sun连上，替换切下来的ccdb，这里要用到两个酶，一个**a1限制性内切酶切开，一个dna连线酶把新片段连上，植物转基因载体和这些酶都是非常常用的试剂。
载体构建好之后需要把它们汇入大肠桿菌中複製，这里就要用到大肠桿菌的感受态了，十把构建好的载体和感受态混合，然后放到42度热水处理个1分钟，再冰上放个3分钟。
这时需要一些培养细菌的培养基来培养菌们，大肠桿菌这种菌很好养活，唯一需要注意的是，灭菌过后的培养基要小心储存。把在冰上处理过的大肠桿菌放到培养基中培养一天，为了防止没有转入载体的菌也混进来，我们在载体上加入了一个抵抗抗生素的基因。
这样我们在培养基中加入这种抗生素，在里面就只有需要的大肠桿菌能生长了。最后得到了上亿个携带着含有我们的sun基因的载体的大肠桿菌，这时就需要把质粒再提出来。
实验室里提质粒需要用专门的试剂盒，也可以简化一下，先把菌液离心让菌沉澱，然后再用水把菌打散，然后煮沸1分钟再离心，取上清，上清中加乙醇让dna析出，再离心让dna沉澱，最后用水把dna溶解。这样提出来的dna会有很多杂质以及细菌的基因组dna。
热心网友的回答：
用限制酶分别切割目的基因两侧及运载体，然后在dna连线酶的作用下就形成了基因表达载体。
紫耀星之轨迹的回答：
首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同
一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先硷基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，硷基之间形成氢键，再加入适量dna连线酶，催化两条dna链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连线起来，形成一个重组dna分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠桿菌中的质粒dna分子结合，形成重组dna分子（也叫重组质粒）的。
怎样构建目的基因表达载体
句月听风的回答：
先看錶达载体有哪些合适的酶切位点，比如ndei,ncoi这样识别序列有atg起始密码子的，再看看目的基因含不含有这些位点，含有就不好连线了，挑好位点，计算下读码框是否正确，保证核糖体结合位点后的第一个atg与目的基因是间隔3的倍数个硷基。下游的位点更好选，如果有6xhis标籤，想融合表达的话，就注意下要是同一读码框，同时利用载体的终止密码子，如果没有这样的需要，就利用目的基因本身的终止密码子好了。基本是这样，具体还是看看书吧。
下列关于基因表达载体的构建描述错误的是（ ）a．基因表达载体的构建是基因工程的核心b．基因表达载体
幻世萌的回答：
a、基因表达载体使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用，是基因工程的核心，a正确；
b、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，b正确；
c、目的基因主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子，c正确；
d、由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因汇入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，d错误．
故选：d．
构建基因表达载体需要哪些工具
热心网友的回答：
大致需要以下几种东西：（1）原始表达载体，用以把目的基因连上去；（2）扩增目的基因的模板；（3）核酸内切酶，用于切割载体和目的基因；（4）连线酶，用于连线目的基因和载体；（5）大肠桿菌感受态，用于转化筛选阳性克隆。
佛树花江燕的回答：
在构建基因表达载体时要用到的工具酶有限制酶和dna连线酶。
基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
过程：首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同
一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先硷基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，硷基之间形成氢键，再加入适量dna连线酶，催化两条dna链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连线起来，形成一个重组dna分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠桿菌中的质粒dna分子结合，形成重组dna分子（也叫重组质粒）的。
众志成城 解释 万众一心，象坚固的城墙一样不可摧毁。比喻团结一致，力量无比强大。出自 国语 周语下 众心成城，众口铄金。示例 段祺瑞既得国务员同情，便以为 正可一战。蔡东藩 许廑父 通俗演义 第八十八回 近义词 众擎易举 万众一心 戮力同心 反义词 一盘散沙 四分五裂 同床异梦 语法 主谓式 作谓语...
完整的表达copy载体必须包括 1 複製子，bai在细菌中扩增时所必须du。2 启zhi动子，目的基因在细菌或细胞中dao转录所必须，转录了才能翻译，是谓 表达 3 原核筛选标记，细菌增菌所必须。4 真核筛选标记，如果是真核表达，就是必须的。5 多克隆位点，即酶切位点，插入目的片段的区域。6 其他所...
1 用限制bai酶切割dna后，可du能产生黏性末端，也可zhi能产dao生平口末端 若要版在限制酶基因工权程中，往往採用同种限制酶切割目的基因和质粒以产生相同的黏性末端，再用dna连线酶使其直接进行连线 2 rna聚合酶识别和结合的部位是启动子 将目的基因汇入微生物细胞时，常用ca2 处理微生物细...
