千叶雅之的回答:
梯度淋洗,就是程式洗脱,简称就是梯度。
主要就是变化流动相比例。主要目
的就是为了分离样品,其次还有减短分析时间,改善峰型,提高灵敏度等等。
比如这个梯度,流动相a是磷酸盐水相,b是乙腈保留时间(min) 乙腈(%)
0 1020 3030 3032 1040 10相当于这种状态
就是从0-20min这段时间,逐步往里面加入乙腈,这样的话有助于极性相似的物质分离。如果是里面有一个极性比较小的物质,那么乙腈量增大,这个物质出峰时间就会提前。减短了分析时间。
高效液相色谱分析法中为什么要採用梯度淋洗
热心网友的回答:
当被分离组分较複杂时,等梯度洗脱难以将组分很好的分离并完全洗脱,就得考虑梯度洗脱了。液相色谱的梯度洗脱作用类似于气相色谱的程式升温,总之,为了达到更好的分离效果。
高效液相色谱分析法中为什么要採用梯度淋洗
热心网友的回答:
色谱法(chromatography)又称色谱分析、色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。
1、色谱的起源
色谱法起源于20世纪初,2023年**植物学家米哈伊尔•茨维特用碳酸钙填充竖立的玻璃管,以石油醚洗脱植物色素的提取液,经过一段时间洗脱之后,植物色素在碳酸钙柱中实现分离,由一条色带分散为数条平行的色带。由于这一实验将混合的植物色素分离为不同的色带,因此茨维特将这种方法命名为chromatography,这个单词最终被英语等拼音语言接受,成为色谱法的名称。汉语中的色谱也是对这个单词的意译。
色谱法茨维特并非着名科学家,他对色谱的研究以俄语发表在**的学术杂誌之后不久,第一次世界大战爆发,欧洲正常的学术交流被迫终止。这些因素使得色谱法问世后十余年间不为学术界所知,直到2023年德国柏林威廉皇帝研究所的库恩将茨维特的方法应用于叶红素和叶黄素的研究,库恩的研究获得了广泛的承认,也让科学界接受了色谱法,此后的一段时间内,以氧化铝为固定相的色谱法在有色物质的分离中取得了广泛的应用,这就是今天的吸附色谱。
高效液相色谱分析法中为什么要採用梯度淋洗
热心网友的回答:
因为物质性质差别大,用单一浓度不能分离所有杂质;或时间太长,后面的峰就会变形
高效液相色谱分析法中为什么要採用梯度淋洗
深水◇静流的回答:
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程式洗提。
在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩分析间週期,广泛採用程式升温的方法。而在液相色谱中则採用梯度洗脱的方法。在同一个分析週期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。
从而可以使一个複杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。
梯度洗脱的优点:1.缩短分析週期;2.提高分离能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
梯度洗脱的原理: 流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k',并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。
梯度洗脱特点: 提高柱效改善检测器的灵敏度当样品中的一个峰的k'值和最后一个峰的k'值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恆流泵,否则难获重複结果。
热心网友的回答:
朋友,为了节省分析时间
高效液相色谱为什么要进行purge工作?
热心网友的回答:
这个不是绝对的。因为在液相色谱工作的时候,进入气泡是特别麻烦的事,尤其是进入检测器里,有时很难弄出去。而进气泡最容易的地方就是流动相那个过滤头,几乎99%的情况的气泡都是从那进去的,所以通过泵进入柱子前的时候,加了一个purge阀,如果有气泡的话,可以直接排出去了,还有就是有时更换系统的时候,由于如果有色谱柱的时候压力过大,柱子不能承受,所以只能用1-2ml/min的流速来沖洗系统,但如果开启purge阀的话,那流速就可以设定为2-3甚至是5ml/min,那样的话,转换系统的速度就非常快了,节约了 大量的时间。
在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用是什么
热心网友的回答:
梯度洗脱装置分两种:
高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入
低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。
梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。
但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。
梯度洗脱时应注意:
1、注意各溶剂间的互溶性。
2、对溶剂的纯度要求更高(影响重现性)。
3、注意梯度变化时系统压力的变化,防止超出限度。
4、梯度结束后,用初始流动相沖洗,使柱子平衡一段时间(再生),使系统回覆到初始状态。(梯度週期)
5、低压梯度要注意脱气,混合后容易产生气泡。
6、容易出现鬼峰,应作空白试验。
7、梯度选择时儘量几相之间相变化要小,否则不易平衡。
8、梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器(如紫外吸收检测器或荧光检测器),而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器(如示差折光检测器)。
9、要注意水相中盐的浓度,防止在有机相提升过程中盐的析出。
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