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荧光分析是指利用某些物质在紫外光照射下产生荧光的特性及其强度进行物质的定性和定量的分析的方
差异蛋白表达荧光分析
差异蛋白表达荧光分析
法。2023年g.g.
斯托克斯(发现荧光，真正的荧光光谱测量则始于本世纪60年代。荧光定量分析常採用直接比较法，将试样与已知物质同时放在紫外光源下，根据它们所发荧光的性质、颜色和强度，鉴定它们是否含有同一荧光物质。某些物质在加入某种试剂后，其产物会产生荧光，也可採用同样方法鉴定。
最常用的方法是用荧光分光光度计绘製试样的荧光激发光谱和荧光发射光谱，并与已知物质的这两种光谱进行比较，从而鉴定所含成分。荧光定量分析是先将已知的荧光物质配成不同浓度的标準溶液，用荧光分光光度计测量其在某一波长处的荧光强度并绘製标準曲线，而后再完全相同的条件下测量试样的荧光强度，由标準曲线查出待测物质的含量。70年代以来，荧光分析在仪器、方法和试剂等方面发展非常迅速，在环境监测中有着广泛的应用：
藉助于有机试剂进行荧光分析的无机元素已达60余种，分析灵敏度可达微克/升级，与原子吸收谱法相近，但光谱干扰少；荧
拉曼光谱与荧光光谱的区别是什么？
oyll玲的回答：
简单来说,拉曼就是光散射后发生的频率改变;
荧光则是分子吸收能量再由于碰撞释放能量产生的。
荧光光谱:当物质分子吸收了特徵频率的光子,就由原来的基态能级跃迁至电子激发态的各个不同振动能级.激发态分子经与周围分子撞击而消耗了部分能量,迅速下降至第一电子激发态的最低振动能级,并停留约10-9秒之后,直接以光的形式释放出多余的能量,下降至电子基态的各个不同振动能级,此时所发射的光即是荧光。
产生荧光的第一个必要条件是该物质的分子必须具有能吸收激发光的结构,通常是共轭双键结构;第二个条件是该分子必须具有一定程度的荧光效率,即荧光物质吸光后所发射的荧光量子数与吸收的激发光的量子数的比值.使激发光的波长和强度保持不变,而让荧光物质所发出的荧光通过发射单色器照射于检测器上,亦即进行扫描,以荧光波长为横座标,以荧光强度为纵座标作图,即为荧光光谱,又称荧光发射光谱。
让不同波长的激发光激发荧光物质使之发生荧光,而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上,然后以激发光波长为横座标,以荧光强度为纵座标所绘製的图,即为荧光激发光谱.荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关。
拉曼光谱:当激发光的光子与作为散射中心的分子相互作用时,大部分光子只是发生改变方向的散射,而光的频率并没有改变,大约有佔总散射光的10-10~10-6的散射,不仅改变了传播方向,也改变了频率.这种频率变化了的散射就称为拉曼散射.
对于拉曼散射来说,分子由基态e0被激发至振动激发态e1。
光子失去的能量与分子得到的能量相等为△e。不同的化学键或基团有不同的振动能级,△e反映了指定能级的变化。因此,与之相对应的光子频率变化也是具有特徵性的,根据光子频率变化就可以判断出分子中所含有的化学键或基团。
分子吸收光子后会跃迁到高的 电子激发态。处于高电子激发态的分子不稳定，回会弛豫回到基态答，在这个过程中有以下几种可能 1 经过辐射跃迁返回基态，这个过程放出光子，即荧光 2 无辐射跃迁回到基态，这个过程没有荧光 3 无辐射跃迁来到三重态，这个过程称为系间窜越。下面说说荧光光谱 荧光光谱的测量是将样品...
材料发光原理 光照射在某些物质上时，基态分子吸收光后跃迁为激发态，激发态分子在因转动，振动等损失一部分激发能量后，以无辐射跃迁下降到低振动能级，再从低振动能级下降到基态，过程中激发态分子将以光的形式释放出能量，该光称为荧光。影响辐射跃迁过程的不仅是该过程的初态和末态的能级位置和性质，在激发过程中涉及...
激发光谱 荧光物质在不同波长的激发光作用下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况。发射光谱 在某一固定波长的激发光作用下荧光强度在不同波长处的分布情况。在分子荧光分析法中,样品的荧光发射和吸收光谱之间有何关联 吸收光谱实际就是激发光谱,将电子从基态激发到激发态。发射光谱则是电子从激发态返回基态产生的光...
