什么是限制性内切酶?它识别和切割DNA分子有何特点

fjmyhfvclm2025-01-28  2

阳光de天使的回答:


限制性内切酶是一种可以特异性识别特定的dna位点并对该dna分子进行切割的一种酶。它识别的位点一般为迴文序列,有这个位点就会切,但不一定是在特异性位点附近切割(可能会将具有这个位点的dna随意切割,也可能只在位点附近或位点处切割,要看这种内切酶的型别)。

热心网友的回答:


限制性内切酶就是从dna分子内部切割dna硷基的酶,识别位点多是具有廻文结构的序列,一般专一性很强,即识别的序列只有一种,但有的酶专一性差点。

廻文结构:像5『agct 3』这样的结构,它的互补链从5『到3』的顺序也是agct。

热心网友的回答:


切割dna的酶 具有专一性 每种限制性内切酶只能识别一种硷基序列

什么是限制性内切酶?有何特点?它的发现有何特殊意义

步秀荣宾桥的回答:


特异性识别核酸的迴文序列,能对dna

进行特异性剪下的一种酶。在基因工程中作用很大,用于切割目的基因等,提供了新的研究手段,推动了生物学发展

听风的回答:


限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种型别,分别是第一型(type i)、第二型(type ii)及第三型(type iii)。ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主dna的甲基化,又催化非甲基化的dna的水解;而ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的dna的水解。

iii型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。

限制作用实际就是限制酶降解外源dna ,维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用,可使腺嘌呤a和胞嘧啶c甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。

所以,能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌,其自身的基因组中可能有该酶识别的序列,只是该识别序列或酶切位点被甲基化了。

限制性内切酶有几类?各有什么特点

soumns马的回答:


根据限制酶的结构,辅因

子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种型别,分别是第一型(type i)、第二型(type ⅱ)及第三型(type ⅲ)。

第一型限制酶

同时具有修饰(modification)及识别切割(restriction)的作用;另有识别(recognize)dna上特定硷基序列的能力,通常其切割位(cleavage site)距离识别位(recognition site)可达数千个硷基之远。例如:ecob、ecok。

第二型限制酶

只具有识别切割的作用,修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的迴文序列(palindrome sequence);所剪下的硷基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。

例如:ecori、hindⅲ。

第三型限制酶

与第一型限制酶类似,同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列,切割位与识别序列约距24-26个硷基对。例如:hinfⅲ。

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限制性内切酶分类性质

根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即i类酶和ⅱ酶。最早从大肠桿菌中发现的ecok、ecob就属于i类酶。其分子量较大;反应过程中除需mg2+外,还需要s-腺苷-l甲硫氨酸、atp;在dna分子上没有特异性的酶解片断,这是i、ⅱ类酶之间最明显的差异。

因此,i类酶作为dna的分析工具价值不大。ⅱ类酶有ecor i、bamh i、hind ⅱ、hind ⅲ等。其分子量小于105道尔顿;反应只需mg2+;最重要的是在所识别的特定硷基顺序上有特异性的切点,因而dna分子经过ⅱ类酶作用后,可产生特异性的酶解片断,这些片断可用凝胶电泳法进行分离、鉴别。

限制性内切酶识别dna序列中的迴文序列。有些酶的切割位点在迴文的一侧(如ecor i、bamh i、hind等),因而可形成粘性末端,另一些ⅱ类酶如alu i、bsur i、bal i、hal ⅲ、hpa i、**a i等,切割位点在迴文序列中间,形成平整末端。

热心网友的回答:


限制性内切酶主要分成三大类。第一类限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序,并在识别点附近的一些核苷酸上切割dna分子中的双链,但是切割的核苷酸顺序没有专一性,是随机的。这类限制性内切酶在dna重组技术或基因工程中没有多大用处,无法用于分析dna结构或克隆基因。

这类酶如ecob、ecok等。

第二类限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序,并在该顺序内的固定位置上切割双链。由于这类限制性内切酶的识别和切割的核苷酸都是专一的。所以总能得到同样核苷酸顺序的dn**段,并能构建来自不同基因组的dn**段,形成杂合dna分子。

因此,这种限制性内切酶是dna重组技术中最常用的工具酶之一。这种酶识别的专一核苷酸顺序最常见的是4个或6个核苷酸,少数也有识别5个核苷酸以及7个、9个、10个和11个核苷酸的。第二类限制性内切酶的识别顺序是一个迴文对称顺序,即有一箇中心对称轴,从这个轴朝二个方向「读」都完全相同。

这种酶的切割可以有两种方式。一是交错切割,结果形成两条单链末端,这种末端的核苷酸顺序是互补的,可形成氢键,所以称为粘性末端。另一种是在同一位置上切割双链,产生平头末端。

第三类限制性内切酶也有专一的识别顺序,但不是对称的迴文顺序。它在识别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切割双链。但这几个核苷酸对则是任意的。

因此,这种限制性内切酶切割后产生的一定长度dn**段,具有各种单链末端。这对于克隆基因或克隆dn**段没有多大用处。

限制性内切酶有哪些特点?

中国农业出版社的回答:


在20世纪60年代,人们就注意到dna在感染宿主后会被降解的现象,从而提出限制性内切酶的概念。

2023年,首次从emphasis:role=italice.coli:

emphasisk中分离到限制性内切酶,它有特定的识别位点但没有特定的切割位点,其中切割位点离识别位点达1000bp以上。2023年,美国约翰·霍布金斯大学的**ith偶然发现,流感嗜血桿菌(emphasis:role=italichaemophilus:

influenzaeemphasis)能迅速降解外源的噬菌体dna,其细胞提取液可降解emphasis:role=italice.coli:

emphasisdna,但不能降解自身dna,从而找到emphasis:role=italichinemphasisdⅱ限制性内切酶。

emphasis:role=italichinemphasisdⅱ限制性内切酶位点和切割位点如下::role=center5′-gttc↓agac-3′:

role=center3′-caag↑tctg-5′从此以后,发现的限制性内切酶越来越多,并且许多已经在实践中得到应用。emphasis:role=italicecoemphasisri是应用最广泛的限制性内切酶,切割位点如下::

role=center5′g↓aattc3′:role=center3′cttaa↑g5′限制性内切酶的命名遵循一定的原则,主要依据**而定,涉及宿主的种名、菌株号或生物型。

命名时,依次取宿主属名第一字母,种名头两个字母,菌株号,然后再加上序号(罗马数字)。如emphasis:role=italichinemphasisd:

ⅲ限制性内切酶,emphasis:role=italichinemphasis指**于流感嗜血桿菌,d表示来自菌株rd,ⅲ表示序号。以前在限制性内切酶和修饰酶前加r或m,且菌株号和序号小写,但现在限制性内切酶名称中的r省略不写。

2023年下半年发现615种限制酶和98种甲基化酶;2023年发现10000种细菌或古细菌中存在3000种酶,且有200多种特异性。到2023年1月,共发现4342种限制酶和甲基化酶,其中限制酶有3681种,包括i型、ⅱ型、ⅲ型限制酶各有59、3612、10种。i类限制性核酸内切酶:

由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于atp的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的dna序列位点,随机切断在识别位点以外的dna序列,这类酶的作用需要mgsuperscript2+superscript、s腺苷甲硫氨酸及atp等的参与。

ⅲ型限制与修饰系统的酶种类更少,所佔比例不到1%,如emphasis:role=italicecoemphasisp1和emphasis:role=italicecoemphasisp15,它们的识别位点分别是agacc和cagcag,切割位点则在下游2426bp处。

在基因操作中,一般所说的限制酶或修饰酶,除非特指,均指ⅱ型限制性核酸内切酶类。与i型限制性核酸内切酶相比,ⅱ型限制性核酸内切酶的特点是其切割位点靠近识别序列,切割产生具有黏性末端或平末端的dn**段。其基本特性为:

在dna分子双链的特异性识别部位,切割dna分子产生链的断裂;2个单链断裂部位在dna分子上的分布通常不是彼此相对的;断裂形成的dn**段往往具有互补的单链延伸末端。

皇欣溥春柔的回答:


1、能识别双链分子的某种特定核苷酸序列2、使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开

答案 什么是dna的限制性内切酶?它在分子生物学研究上有何重要意义

的回答:


限制性核酸内切酶主要用于转基因技术,它可以识别并切割dna的一段特定序列

常用dna限制性内切酶有哪些?

hi漫海的回答:


内切酶主要分成三大类。

第一类内切酶能识别专一的核苷酸顺序,并在识别点附近的一些核苷酸上切割dna分子中的双链,但是切割的核苷酸顺序没有专一性,是随机的。这类限制性内切酶在dna重组技术或基因工程中没有多大用处,无法用于分析dna结构或克隆基因。这类酶如ecob、ecok等。

第二类内切酶能识别专一的核苷酸顺序,并在该顺序内的固定位置上切割双链。由于这类限制性内切酶的识别和切割的核苷酸都是专一的。所以总能得到同样核苷酸顺序的dn**段,并能构建来自不同基因组的dn**段,形成杂合dna分子。

因此,这种限制性内切酶是dna重组技术中最常用的工具酶之一。这种酶识别的专一核苷酸顺序最常见的是4个或6个核苷酸,少数也有识别5个核苷酸以及7个、9个、10个和11个核苷酸的。如果识别位置在dna分子中分布是随机的,则识别4个核苷酸的限制性内切酶每隔46(4096)个核苷酸就有一个切点。

人的单倍体基因组据估计为3×199核苷酸,识别4个核苷酸的限制性内切酶的切点将有(3×109/2.5×102)约107个切点,也就是可被这种酶切成107片段,识别6个核苷酸的限制性内切酶也将有(3×109/4×103)约106个切点。

第二类内切酶的识别顺序是一个迴文对称顺序,即有一箇中心对称轴,从这个轴朝二个方向「读」都完全相同。这种酶的切割可以有两种方式。一是交错切割,结果形成两条单链末端,这种末端的核苷酸顺序是互补的,可形成氢键,所以称为粘性末端。

如ecori的识别顺序为:

↓ |5』……gaa | ttc……3』

3』……ctt | aag……5』

| ↑垂直虚线表示中心对称轴,从两侧「读」核苷酸顺序都是gaattc或cttaag,这就是迴文顺序(palindrome)。实线剪头表示在双链上交错切割的位置,切割后生成5』……g和aattc……3』、3』……cttaa和g……5』二个dn**段,各有一个单链末端,二条单链是互补的,可通过形成氢键而「粘合」。另一种是在同一位置上切割双链,产生平头末端。

例如haeⅲ的识别位置是:

↓5』……gg↓cc……3』

3』……cc↓gg……』

↑在箭头所指处切割,产生的两个dn**段是:

5』……gg cc……3』

和3』……cc gg……5』

有时候两种限制性内切酶的识别核苷酸顺序和切割位置都相同,差别只在于当识别顺序中有甲基化的核苷酸时,一种限制性内切酶可以切割,另一种则不能。例如hpaⅱ和mspⅰ的识别顺序都是5』……ccgg……3』,如果其中有5』-甲基胞嘧啶,则只有hpaⅱ能够切割。这些有相同切点的酶称为同切酶或异源同工酶(isoschizomer)。

第三类内切酶也有专一的识别顺序,但不是对称的迴文顺序。它在识别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切割双链。但这几个核苷酸对则是任意的。

因此,这种限制性内切酶切割后产生的一定长度dn**段,具有各种单链末端。这对于克隆基因或克隆dn**段没有多大用处。

限制性内切酶copy 一般指限制性核酸内切酶,限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种型别,分别是第一型 type i 第二型 type ii 及第三型 ...

根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种型别,分别是第一型 type i 第二型 type 及第三型 type 与第一型限制酶类似,同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列,切割位与识别序列约距24 26个硷基对。例如 hinf 限制性内切酶有几类?各有什么特点 根...

理论上是对的,但如果较真有特殊情况,拿常用的内切酶来说,bamh i和 bgl ii的酶切作用效果是相同的,你可以拿一个切基因,一个切载体,还是可以连线上。不对,只要是可以识别切割同一基同因序列的限制性内切酶就可以。基因工程中,是否常用一种限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体 是的,这样可以是得到的...

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